技術(shù)文章
Technical articles目的探討冬凌草甲素對肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響和分子機(jī)制。方法采用不同濃度的冬凌草甲素干預(yù)肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)48h。分別采用噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)檢測HSC-T6細(xì)胞增殖和凋亡變化。采用實(shí)時熒光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白質(zhì)印記(Westemblot)檢測泛素結(jié)合酶9(UBC9)表達(dá)變化。轉(zhuǎn)染UBC9小干擾RNA(si-UBC9)下調(diào)HSC-T6細(xì)胞中UBC9表達(dá)水平,采用上述方法檢測細(xì)胞增殖、凋亡變化。結(jié)果冬凌草甲素干預(yù)后,HSC-T6細(xì)胞增殖抑制率...
目的探究槲皮素對鎘致小鼠肝損傷的保護(hù)效應(yīng)及機(jī)制。方法C57BL/6J小鼠分為對照組、鎘組(灌胃氯化鎘)、槲皮素組(灌胃槲皮素)、鎘與槲皮素共處理組(灌胃氯化鎘+槲皮素)。給藥結(jié)束后,測定小鼠體質(zhì)量、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性及血清與肝組織中總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量;HE染色觀察肝組織病理學(xué)變化,油紅O染色觀察肝組織脂滴變化;免疫印跡法檢測脂質(zhì)合成關(guān)鍵酶脂肪酸合成酶(FAS)與分解關(guān)鍵酶脂蛋白脂酶(LPL)變化。結(jié)果與對照組相比,鎘染毒小...
目的探討脊髓損傷小鼠除運(yùn)動功能障礙外,在自主運(yùn)動、探索行為和自我照顧行為等家籠(homecage)內(nèi)精細(xì)行為方面的異常表現(xiàn)。方法8周齡雌性C57BL/6小鼠10只,接受T10脊髓打擊造模。另選11只小鼠為假手術(shù)組。術(shù)后1~5周,每日固定時間將小鼠置于家籠中記錄其精細(xì)行為,使用HomeCageScan軟件分析動物32種日常行為所占時間百分比。結(jié)果與假手術(shù)組動物相比,早期脊髓損傷小鼠的探索行為、自主運(yùn)動和自我照顧行為中多數(shù)行為活動均存在顯著異常(P<0.01),部分行為在損傷后1...
今天小編給大家講講動物實(shí)驗(yàn)檢測頻率及采樣方法:1.目的為了保證動物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,提供安全科學(xué)的實(shí)驗(yàn)前動物信息,特對動物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測。2.內(nèi)容2.1檢測頻率2.1.1普通級動物:每三個月至少檢測動物一次。2.1.2清潔級動物:每三個月至少檢測動物一次。2.1.3無特定病原體動物:每三個月至少檢測動物一次。2.1.4無菌動物:每年檢測動物一次。每2-4周檢查一次動物的生活環(huán)境標(biāo)本和糞便標(biāo)本。一般來說,一旦病原體入侵動物群體引起感染,初期分離病原體較容易,隨后抗體的檢出率上升,2-3個...
1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液(0.5mg/kg),第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā),每天于上午下午固定時間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結(jié)束后24小時,小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實(shí)驗(yàn)取體重200-260g豚鼠,雌雄各半,置于50...
(一)佐劑誘導(dǎo)型(AA)AA早由Freund于20世紀(jì)50年代創(chuàng)立,又稱弗氏佐劑關(guān)節(jié)炎,介導(dǎo)溶劑分為*佐劑(CFA)和不*佐劑(IFA)。通常用CFA作介導(dǎo)劑,AA模型在T細(xì)胞相關(guān)致炎通路的藥物篩選上發(fā)揮著重要的作用。(二)膠原誘導(dǎo)型(CIA)CIA模型是由Trentham等于1977年*建立的實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎動物模型。通過皮下注射Ⅱ型膠原和等量CFA的混合液來建造,來源于雞、小牛和大鼠的Ⅱ型膠原均能引起關(guān)節(jié)炎癥。CIA是MHC相關(guān)型,以T/B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎癥侵蝕為主要特征...
除了一些安全性評價動物實(shí)驗(yàn)外,我們這里提到的大多數(shù)動物實(shí)驗(yàn)都是整體科學(xué)研究計劃的一個重要組成部分,動物實(shí)驗(yàn)往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計,我們有對一般科學(xué)實(shí)驗(yàn)的整體設(shè)計進(jìn)行簡單的論述。廣義來講,科學(xué)研究選題是由社會發(fā)展和人們生活水平?jīng)Q定的(如癌癥和心血管疾病的發(fā)生就和人們所處生活環(huán)境有很大的關(guān)系);狹義來講,科學(xué)研究的選題是由研究機(jī)構(gòu)目標(biāo)和能力來決定,或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂...
一、WesternBlot實(shí)驗(yàn)為什么要用內(nèi)參?WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行內(nèi)參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達(dá)量的相對多少,前提條件是等量的組織細(xì)胞蛋白上樣,才有比較的基礎(chǔ),特別是表達(dá)量不高時,上樣量的的差別就很有可能影響結(jié)果的分析。因此,在WesternBlot試驗(yàn)中,進(jìn)行內(nèi)參的檢測,有以下兩點(diǎn)作用:1、校正蛋白質(zhì)定量、上樣過程中存在的誤差,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;2、使用內(nèi)參可以作為空白對照,檢測蛋白轉(zhuǎn)膜情況是否、整個WesternBlot顯色發(fā)光體系是否正常。二、你的內(nèi)...