技術(shù)文章
Technical articles一、背景海馬是大腦顳葉內(nèi)側(cè)的一個(gè)解剖結(jié)構(gòu),因?yàn)樾螤铑愃坪qR稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經(jīng)元,海馬神經(jīng)元的生理功能與人的記憶密切相關(guān)。一些疾病會(huì)使海馬神經(jīng)元出現(xiàn)損傷,比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等,如果這些疾病出現(xiàn),就會(huì)導(dǎo)致記憶障礙,甚至癡呆的表現(xiàn)。神經(jīng)細(xì)胞是近代神經(jīng)學(xué)科中研究重點(diǎn)之一,神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內(nèi)生長(zhǎng)條件,使神經(jīng)細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在其生存和生長(zhǎng)并維持其形態(tài)和功能的方法。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)...
一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動(dòng)的高級(jí)中樞。它由初級(jí)感覺區(qū)、初級(jí)運(yùn)動(dòng)區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個(gè),面積約2200平方厘米,主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞(顆粒細(xì)胞)及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段,越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,動(dòng)物出生后很少分裂,相對(duì)于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長(zhǎng)。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營(yíng)養(yǎng)條件均較為特殊。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.無菌條件下,從懷...
在本號(hào)前文《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為何要開展倫理審查》中曾提到“在科學(xué)界,部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的計(jì)劃制定者和實(shí)施者也存在著否定、不接受或不關(guān)注科學(xué)研究與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理之間存在關(guān)聯(lián)的事實(shí)”。那么動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理審查與科學(xué)或者科學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果真的不相干嗎?答案顯然是否定的。我們都知道實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)除了設(shè)備、信息和試劑外的另一個(gè)基本要素。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展,科學(xué)家們很容易獲得高精尖的儀器設(shè)備、高精純的化學(xué)試劑和相關(guān)研究領(lǐng)域的情報(bào)信息。遺憾的是,科學(xué)家們?cè)趯?shí)際工作中,往往非常重視設(shè)備、信息和試...
目的探討冬凌草甲素對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響和分子機(jī)制。方法采用不同濃度的冬凌草甲素干預(yù)肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)48h。分別采用噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC-T6細(xì)胞增殖和凋亡變化。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白質(zhì)印記(Westemblot)檢測(cè)泛素結(jié)合酶9(UBC9)表達(dá)變化。轉(zhuǎn)染UBC9小干擾RNA(si-UBC9)下調(diào)HSC-T6細(xì)胞中UBC9表達(dá)水平,采用上述方法檢測(cè)細(xì)胞增殖、凋亡變化。結(jié)果冬凌草甲素干預(yù)后,HSC-T6細(xì)胞增殖抑制率...
目的探究槲皮素對(duì)鎘致小鼠肝損傷的保護(hù)效應(yīng)及機(jī)制。方法C57BL/6J小鼠分為對(duì)照組、鎘組(灌胃氯化鎘)、槲皮素組(灌胃槲皮素)、鎘與槲皮素共處理組(灌胃氯化鎘+槲皮素)。給藥結(jié)束后,測(cè)定小鼠體質(zhì)量、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性及血清與肝組織中總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)含量;HE染色觀察肝組織病理學(xué)變化,油紅O染色觀察肝組織脂滴變化;免疫印跡法檢測(cè)脂質(zhì)合成關(guān)鍵酶脂肪酸合成酶(FAS)與分解關(guān)鍵酶脂蛋白脂酶(LPL)變化。結(jié)果與對(duì)照組相比,鎘染毒小...
目的探討脊髓損傷小鼠除運(yùn)動(dòng)功能障礙外,在自主運(yùn)動(dòng)、探索行為和自我照顧行為等家籠(homecage)內(nèi)精細(xì)行為方面的異常表現(xiàn)。方法8周齡雌性C57BL/6小鼠10只,接受T10脊髓打擊造模。另選11只小鼠為假手術(shù)組。術(shù)后1~5周,每日固定時(shí)間將小鼠置于家籠中記錄其精細(xì)行為,使用HomeCageScan軟件分析動(dòng)物32種日常行為所占時(shí)間百分比。結(jié)果與假手術(shù)組動(dòng)物相比,早期脊髓損傷小鼠的探索行為、自主運(yùn)動(dòng)和自我照顧行為中多數(shù)行為活動(dòng)均存在顯著異常(P<0.01),部分行為在損傷后1...
今天小編給大家講講動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)頻率及采樣方法:1.目的為了保證動(dòng)物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,提供安全科學(xué)的實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物信息,特對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。2.內(nèi)容2.1檢測(cè)頻率2.1.1普通級(jí)動(dòng)物:每三個(gè)月至少檢測(cè)動(dòng)物一次。2.1.2清潔級(jí)動(dòng)物:每三個(gè)月至少檢測(cè)動(dòng)物一次。2.1.3無特定病原體動(dòng)物:每三個(gè)月至少檢測(cè)動(dòng)物一次。2.1.4無菌動(dòng)物:每年檢測(cè)動(dòng)物一次。每2-4周檢查一次動(dòng)物的生活環(huán)境標(biāo)本和糞便標(biāo)本。一般來說,一旦病原體入侵動(dòng)物群體引起感染,初期分離病原體較容易,隨后抗體的檢出率上升,2-3個(gè)...
1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液(0.5mg/kg),第21~23天連續(xù)3天以0.5%的OVA溶液霧化激發(fā),每天于上午下午固定時(shí)間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結(jié)束后24小時(shí),小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發(fā)豚鼠咳嗽實(shí)驗(yàn)取體重200-260g豚鼠,雌雄各半,置于50...