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Product Center當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)動物模型構(gòu)建大鼠陰虛動風(fēng)模型
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗(yàn),多年的藥效學(xué)陰虛動風(fēng)模型的構(gòu)建,為廣大藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)提供保障??砷_展大小鼠藥效學(xué)陰虛動風(fēng)模型的構(gòu)建。
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建模方法:
3﹪Pelltobarbitalum Natricum 50 mg/kg腹腔注射麻醉。然后將大鼠固定于腦立體定位儀上,頭部去毛,常規(guī)消毒。無菌條件下,沿正中線切開大鼠顱頂皮膚,剝離骨膜,暴露前囟。以前囟為準(zhǔn),根據(jù)包新民[10]等著大鼠腦立體定位圖譜,確定右側(cè)黑質(zhì)二坐標(biāo):
①前囟后5.2 mm,正中線右側(cè)1.0 mm,硬膜下9.0 mm。
②前囟后5.2 mm,正中線右側(cè)2.5 mm,硬膜下8.5 mm。
手術(shù)要求部位小心鉆開顱骨,用5 μL微量進(jìn)樣器將6-OHDA(溶于含0.2﹪維C的生理鹽水中,即秤量藥品抗壞血酸0.001 g,溶于生理鹽水0.5 mL中)注入右側(cè)黑質(zhì)部(以1.0 mm/min速度緩慢進(jìn)針),每孔3 μL,注射速度為1 μL/min,注射完畢后留針5 min,然后以1.0 mm/min速度緩慢退針。手術(shù)完成后,用醫(yī)用明膠海綿填塞顱骨孔,縫合切口皮膚,肌肉注射霉素7天,待動物清醒后放回飼養(yǎng)籠中飼養(yǎng)。假手術(shù)組只注射0.2﹪維C的生理鹽水,正常對照組只捆綁動物,不作任何處理。10 d后,以腹腔注射APO 0.5 mg/kg誘發(fā)大鼠向一側(cè)旋轉(zhuǎn),記錄開始旋轉(zhuǎn)至30 min內(nèi)的旋轉(zhuǎn)圈數(shù),以旋轉(zhuǎn)圈數(shù)平均>7次/min者為合格的PD模型。
將成功PD模型大鼠給予腹腔注射L-dopa + 芐絲肼(50 mg/kg L-dopa和12.5 mg/kg芐絲肼,即L-dopa和芐絲肼溶于含0.05%的乙醇和0.1﹪的抗壞血酸的注射用水中,配成10 mg/mL),每日兩次,連續(xù)2周。正常對照組、假手術(shù)組給予腹腔注射等量的含0.05%的乙醇和0.1%的抗壞血酸的注射用水,每日兩次,連續(xù)2周。2周后誘發(fā)動物,具有典型AIM(AIM評分大于20分)表現(xiàn),且APO誘導(dǎo)大鼠對側(cè)旋轉(zhuǎn)圈數(shù)增加者,為陰虛動風(fēng)證LID模型。
分子實(shí)驗(yàn)平臺:高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺:能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價(jià)、藥代
動力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù):助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化,解決客戶對實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺、專業(yè)人和融資的需求。